Кріочутливість еритроцитів різних видів ссавців

Abstract

Дисертаційна робота присвячена вивченню чутливості еритроцитів різних видів ссавців (кінь, бик і собака) до кріоконсервування під захистом кріопротекторів і оцінці структурно-функціонального стану деконсервованих клітин. Одержані в роботі результаті свідчать про те, що найбільш ефективним кріопротектором в процесі кріоконсервування для еритроцитів коня, бика і собаки є ДМСО. ПЕО-1500 здатний зберігати клітини в процесі заморожування-відігрівання, проте після перенесення таких деконсервованих клітин до фізіологічних умов вони ушкоджуються. Після кріоконсервування з 10%-м ДМСО, на відміну від 15 %-го ПЕО-1500, клітини зберігають морфологічні показники. Після заморожування-відігріву клітин з ПЕО-1500 та ДМСО концентрації АТФ і 2,3-ДФГ зберігаються на рівні контролю. Дослідження білків мембрани еритроцитів всіх видів тварин методом електрофорезу в ПААГ з використанням діаміду показало порушення їх просторового розташування. Модифікація мембранно-цитоскелетного комплексу виявляється у більшій мірі для еритроцитів, кріоконсервованих під захистом ПЕО-1500. Thesis covers study of erythrocyte sensitivity of different mammalian species (horse, bull, dog) to cryopreservation with cryoprotectants and estimation of structural and functional state of frozen-thawed cells. The results obtained in the work testify to the fact, that DMSO is the most efficient cryoprotectant during cryopreservation for horse, bull and dog erythrocytes. PEO-1500 is capable to preserve cells during cryopreservation, but after transferring such frozen-thawed cells under physiological conditions they undergo damages. After cryopreservation with 10% DMSO in contrast to 15% PEO-1500 the cells preserve morphological indexes. ATP and 2,3-DPG concentrations after cryopresevation the control level keep. Investigation of erythrocyte membrane proteins of animals using electrophoresis method in PAG with protein-cross-linking reagent diamide demonstrated a disorder in their spatial location. Modifications of membrane-cytoskeletal complex are stronger manifested for erythrocytes, cryopreserved under PEO- 1500 protection in contrast to DMSO. Диссертационная работа посвящена изучению чувствительности эритроцитов разных видов млекопитающих (лошадь, бык и собака) к криоконсервированию под защитой криопротекторов и оценке структурно-функционального состояния деконсервированных клеток. Полученные в работе результаты свидетельствуют о том, что наиболее эффективным криопротектором в процессе криоконсервирования для эритроцитов лошади, быка и собаки являются ДМСО. ПЭО-1500 способен сохранять клетки в процессе замораживания-отогрева, однако после переноса таких деконсервированных клеток в физиологические условия они повреждаются. После криоконсервирования с 10%-м ДМСО, в отличие от 15% -го ПЭО-1500, клетки сохраняют морфологические показатели. После замораживания-отогрева клеток с ПЭО-1500 и ДМСО концентрации АТФ и 2,3-ДФГ сохраняются на уровне контроля. Исследование белков мембраны эритроцитов всех видов методом электрофореза в ПААГ с использованием диамида показало нарушения их пространственного расположения. Модификация мембранно-цитоскелетного комплекса проявляется в большей степени для эритроцитов, криоконсервированных под защитой ПЭО-1500.